A verdade nunca é exacta, porque sempre a mascaramos com o nosso desejo. E a verdade em que eu quero acreditar não é a de que me queres, mas a que me diz que não sabes o que fazer com o que sentes por mim.

Até podem existir outros homens à espera de entrar na minha vida. Nenhum me interessa. Todos os olhos que me tentam prender se perdem no meu vazio, porque em nenhum vejo os teus olhos.

Sou e serei a mulher mais persistente que se cruzou no teu caminho, nunca conhecerás outra que acredite tanto na justiça dos teus sonhos e que, por isso mesmo, nunca desista deles.

Espero por ti porque acho que podes ser o tal homem... E espero por ti porque sei esperar, porque há uma voz firme e incessante que me pede para esperar por ti.

Não parei de correr por cansaço ou por não saber que direcção seguir... Ajuda-me!

O Amor é isto, dar espaço e tempo a quem se ama, saber esperar, saber estar quieto, saber abrir os braços sem pedir nada em troca... Mesmo quando se quer o oposto, quando se está sofrer e se tem de sorrir...

Não é tarde nem é cedo para quem se quer tanto...

Para me recordares...

Para que quando eu não estiver lá me possas ver... Está para breve...

Tu compreendes sempre o que te estou a tentar dizer para além do que te digo.

Freud

A vida é tão cruel e tão injusta como às vezes é tão boa e tão amável. Simplesmente a vida é um adquirir de conhecimentos. Cada dia que passa é mais uma coisa nova.

Há momentos na vida em que se deveria calar e deixar que o silêncio falasse ao coração, pois há sentimentos que a linguagem não expressa e há emoções que as palavras não sabem traduzir.

Peço-vos que me julguem por aquilo que sou, e por aquilo que faço, e não por aquilo que quereriam que fosse ou fizesse.

Não sei porque estudei tanto na minha vida, se tudo o que eu preciso saber está na geografia do teu corpo, na história dos teus olhos e na química dos teus beijos...

Não exijas dos outros qualidades que ainda não possuem.

Estou cega de tanto ver.

A vida é o que fazemos por ela e o que nos deixam fazer com ela.

Nunca digas que esqueceste um amor, diz apenas que consegues falar nele sem chorar, pois o amor é... inesquecível!

O amor nasce de um olhar,

Cresce de um carinho,

Alimenta-se de um beijo,

Produz um pequeno ciúme,

Vive de um sorriso,

Morre de ingratidão

E renasce de um perdão.

Amar é a tempestade do prazer e o encanto da doçura.

Angelito

Hasta en un sueño
Tus deseos intenté yo complacer
Por tí la luna alcancé
Y en mi jornada un angelito me encontré
Me vió muy triste
Supo que perdí la fé

En mi sueño no ví un rostro
Solo lo escuchaba hablar
Me daba cátedra de amor y al escuchar
Ansiosamente le empezaba a reclamar
¿Cuál es la clave para que me puedas amar?

Primero me dijo que es un pecado
Pensar solo en tí
Segundo que no puedo ni debo aunque quiero
Dar la vida por tí
Tercero que mi destino en el amor
Corre peligro me advierte de tí

Y cuarto que un esclavo en el amor
Le pisotean el corazón
Que aquel que ama pero no demuestra
To’ el cariño se prepara para un desliz

El amor es lo mas raro que ha podido existir
Quien de tí se enamoró
Lo mas probable ni le pones atención
Y otra persona le das una flor, una poesía
Entregas tu corazón
Y si ocurre una desilusión q
Pierdes la esencia y la fé del amor

Esta noche quiero volver a sonar
A ver si aprendo algo más
Y que me salga ese angelito tan divino
Que me ha venido aconsejar

Aventura

As feridas do coração, como as do corpo, mesmo quando saram deixam cicatrizes.

Não creias que rompida uma amizade não tenhas mais deveres a cumprir. São os deveres mais difíceis, nos quais só a honradez te sustenta. Deves respeito à antiga amizade, deves abster-te de tornar as discussões e zangas públicas e de falar delas, a não ser para te justificares.

Quanto mais vigorosa a mente, mais violenta a paixão em que se deixa envolver.

Como eu não tenho o dom de ler pensamentos, eu me preocupo somente em ser amiga e não saber quem é inimigo. Pois assim, eu consigo apertar a mão de quem me odeia e ajudar a quem não faria por mim o mesmo.

Não vemos as coisas como são: vemos as coisas como somos!

Os homens devem amar-se tal como são e não como deveriam ser, porque o amor é um risco sem limites.

Love is difficult to find

Easy to lose

And Hard to forget

Que possas ter a percepção necessária para saberes onde estiveste, a visão necessária para saberes para onde vais e o discernimento necessário para saberes quando estás a ir longe demais.

O verdadeiro amigo não é aquele que nos alegra com mentiras, mas quem nos ofende com as verdades.

Somos facilmente enganados por aqueles que amamos.

Aqueles que esperam por grandes ocasiões para demonstrar a sua ternura não sabem amar.

Chama-me

Quando sentires vontade de chorar, não chores.
Chama-me que eu choro por ti.
Quando sentires vontade de sorrir, avisa-me.
Que eu venho para nós os dois sorrirmos juntos.
Quando sentires vontade de amar, chama-me.
Que eu venho amar-te.
Quando sentires que tudo está acabado, chama-me.
Que eu venho ajudar-te a reconstruir.
Quando achares que o mundo é pequeno demais para as tuas tristezas, chama-me.
Que eu o faço pequeno para a tua felicidade.
Quando precisares de uma mão, chama-me.
Que a minha é sempre tua.
Quando precisares de companhia, naqueles dias nublados e tristes, ou nos dias ensolarados,
Eu venho, venho sim.
Quando precisares de ouvir alguém dizer: eu amo-te!
Chama-me, que eu to digo a toda hora.
E quando não precisares mais de mim, avisa-me,
Que simplesmente irei embora, rezando e torcendo por ti.

Custa, mas terá que ser...

Espero que esse momento ainda demore

Sabendo-se sofrer sofre-se menos...

Porque o céu é azul? O Pôr do Sol Vermelho? As Nuvens Brancas?

Céu Azul?

A resposta está em como os raios solares interagem com a atmosfera.Quando a luz passa através de um prisma, o espetro é quebrado num arco-íris de cores. Nossa atmosfera faz o mesmo papel, atuando como uma espécie de prisma onde os raios solares colidem com as moléculas e são responsáveis pelo dispersão do azul.Quando olhamos a cor de algo, é porque este "algo" refletiu ou dispersou a luz de uma determinada cor associada a um comprimento de onda. Uma folha verde utiliza todas as cores para fazer a fotossíntese, menos o verde, porque esta foi refletida. Devido ao seu pequeno tamanho e estrutura, as minúsculas moléculas da atmosfera difundem melhor as ondas com pequenos comprimentos de onda, tais como o azul e violeta. As moléculas estão espalhadas através de toda a atmosfera, de modo que a luz azul dispersada chega aos nossos olhos com facilidade. Luz azul é dispersada dez vezes mais que luz vermelha.A luz azul tem uma frequência ( ciclos de onda por segundo ) que é muito próximo da frequência de ressonância dos átomos, ao contrário da luz vermelha. Logo a luz azul movimenta os elétrons nas camadas atômicas da molécula com muito mais facilidade que a vermelha. Isso provoca um ligeiro atraso na luz azul que é re-emitida em todas as direções num processo chamado dispersão de Rayleigh ( Físico inglês do século 19 ). A luz vermelha, que não é dispersa e sim transmitida, continua em sua direção original, mas quando olhamos para o céu é a luz azul que vemos porque é a que foi mais dispersada pelas moléculas em todas as direções.Luz violeta tem comprimento de onda menor que luz azul, portanto dispersa-se mais na atmosfera que o azul. Porque então não vemos o céu violeta ? Porque não há suficiente luz ultravioleta. O sol produz muito mais luz azul que violeta.Quando o céu está com cerração, névoa ou poluição, há partículas de tamanho grande que dispersam igualmente todos os comprimentos de ondas, logo o céu tende ao branco pela mistura de cores. Isso é mais comum na linha do horizonte. No vácuo do espaço extraterrestre, onde não há atmosfera, os raios do sol não são dispersos, logo eles percorrem uma linha reta do sol até o observador. Devido a isso os astronautas vêem um céu negro. Em Júpiter o céu também é azul porque ocorre o mesmo tipo de dispersão do azul na atmosfera do planeta como na Terra. Porém em Marte o céu é cor de rosa, ja que há excessiva partículas de poeira na atmosfera Marciana devido à presença de óxidos de ferro originários do solo. Se a atmosfera de Marte fosse limpa da poeira, ela seria azul, porém um azul mais escuro já que a atmosfera de Marte é muito mais rarefeita.

Porque o pôr do sol e a alvorada são vermelhos ?

Quando o sol está no horizonte, a luz leva um caminho muito maior através da atmosfera para chegar aos nossos olhos do que quando está sobre nossas cabeças. A luz azul nesse caminho foi toda dispersada , a atmosfera atua como um filtro , e muito pouca luz azul chega até você, enquanto que a luz vermelha que não é dispersada e sim transmitida alcança nossos olhos com facilidade. Nessa hora a luz branca está sem o azul.Durante a dispersão da luz nas moléculas ocorre o fenômeno de interferência destrutiva em que a onda principal se subdivide em várias outras de menor intensidade e em todas direções, porém mantendo a energia total conservada. O efeito disto é que a luz azul do sol que vinha em linha reta passa a ir em todas as direções. Ao meio dia todas as direções estão próximas de nós mas no entardecer a dispersão leva para longe do nosso campo de visão o azul já que a luz solar percorre uma longa tangente na circunferência da terra até chegar aos nossos olhos. Além disso, o vermelho e o laranja tornam-se muito mais vívidos no crepúsculo quando há poeira ou fumaça no ar, provocado por incêndios, tempestade de poeira e vulcões. Isso ocorre porque essas partículas maiores também provocam dispersão com a luz de comprimento de onda próximos, no caso o vermelho e laranja.

Porque as nuvens são brancas ?

Nas nuvens existem partículas ( gotas de água ) de tamanhos muito maiores que o comprimento de ondas da luz ocorrendo dispersão generalizada em todo o espectro visível e iguais quantidades de azul, verde e vermelho se juntam formando o branco.

Uma paixão no coração de uma pessoa é como a teia de uma aranha. A princípio, ela é um visitante estranho; depois torna-se um hóspede regular; e mais tarde torna-se dona da casa. Muitas vezes as paixões cuja origem não conhecemos ao certo são as que mais nos tiranizam. Em muitos casos, quando acreditamos estar a experimentar nos outros os efeitos das paixões, estamos na verdade a experimentar em nós mesmos.

Se não queres que ninguém saiba, não o faças.

A glória da amizade não é só a mão estendida, nem o sorriso carinhoso, nem mesmo a delícia da companhia. É a inspiração espiritual que vem quando descobres que alguém acredita e confia em ti.

O caminho para a felicidade está em vivermos o presente. Não volte ao passado, nem tente adivinhar o futuro.

Se queres ser feliz por um momento, vinga-te, mas se quiseres ser feliz a vida toda, perdoa.

O medo de sofrer é pior do que o próprio sofrimento.E nenhum coração jamais sofreu quando foi em busca de seus sonhos.

Paulo Coelho-O alquimista

A janela continua sem aparecer... E não consigo fechar a página quanto mais o livro...

O que ando a fazer no ITQB

A pedido de várias famílias vou tentar explicar o que tenho andado a fazer no ITQB.

Ora eu tenho estado a fazer mutagénese dirigida.

Começo por fazer um PCR com o DNA que pretendo mutar e com primers desenhados para o efeito. O que é PCR?

PCR - Polymerase Chain Reaction (em português - reacção em cadeia da polimerase) é um método de amplificação (de criação de múltiplas cópias) de DNA (ácido desoxirribonucleico) sem o uso de um organismo vivo.
O método PCR pode ter início com uma quantidade muito pequena de DNA original - até mesmo o DNA deixado em uma impressão digital poderá ser usado. Durante o processo de PCR, o DNA original é copiado por uma enzima, chamada DNA polimerase, que duplica a cadeia de DNA. Geralmente, só uma pequena parte da cadeia de DNA é copiada usando PCR. Esta parte é seleccionada por iniciadores (primers), curtas cadeias artificiais de DNA (20-40 pares de bases), que se combinam exactamente com cada região terminal da parte a ser copiada. Além do DNA original (que vai servir de base para providenciar as cópias), dos iniciadores e da polimerase, é ainda necessária a presença de desoxirribonucleótidos - as unidades básicas da cadeia de DNA.
A máquina de PCR (termociclador) é basicamente um forno onde um programa controla o tempo e a temperatura.

Aparelho de PCR

O processo de PCR consiste em várias iterações, geralmente 15-30, e cada iteração é composta pelos passos seguintes :

1. Desnaturação (94-96ºC, 30-600 segundos). Durante a desnaturação, a cadeia dupla do DNA é separada em duas cadeias simples, da mesma forma que se abre um "fecho-éclair". A DNA polimerase é estável a altas temperaturas pois é obtida de organismos que vivem em ambientes extremos (extremófilos). A DNA polimerase mais usada é a Taq polimerase (obtida de Thermus aquaticus).

2. Annealing (emparelhamento) (45-80º C, 30-120 segundos). Durante o emparelhamento, os iniciadores ligam-se ao DNA de cadeia simples e a DNA polimerase liga-se aos iniciadores emparelhados.

3. Alongamento (65-80º C, 30-120 segundos). Durante o alongamento, a DNA polimerase cria a cadeia de DNA complementar à medida que percorre o DNA de cadeia simples, incorporando desoxirribonucleótidos presentes na reacção.O bloco de iteraçōes é precedido por um passo único de desnaturação, a fim de assegurar que todo o DNA da amostra se encontra na forma de cadeias simples. Após o bloco de iteraçōes é comum haver um passo extra de alongamento para que a polimerase possa completar todas as novas cadeias formadas. Após cada iteração, a quantidade de DNA duplica. Assim, após múltiplas iterações, o aumento da quantidade de DNA é previsto por uma exponencial de base 2. Por exemplo, após 30 iterações, uma cadeia de DNA é copiada em 230 = 1 073 741 824 cadeias, que são cópias exactas da parte da primeira cadeia seleccionada pelos iniciadores.

O PCR encontra sua principal aplicação em métodos que necessitam de uma quantidade de DNA maior que a disponível. Em teoria, é possível amplificar qualquer DNA. Uma das principais aplicações do PCR é na medicina forense, onde pequenas amostras de DNA retiradas da cena de um crime (pedaços de cabelo, gotas de sangue ou saliva, pedaços de pêlo ou até mesmo a minúscula quantidade de DNA deixada em uma impressão digital) são amplificadas para serem analisadas pelo método de fingerprinting. O PCR também é utilizado para amplificar sequências de DNA para sofrerem mutagénese, para detectar mutações ou para preparar fragmentos a serem utilizados em outros experimentos (inserção em vectores de expressão, por exemplo).

Após ter o PCR pronto faço a digestão dos produtos do PCR, com uma endonuclease, DpnI durante a noite, de forma a eliminar o DNA que não está mutado.

Posteriormente transformo o DNA em E. coli XL1-Blue. Estão aí uma fotos dos meus "girinos"... E depois plaqueio. Em placa tem esse aspecto, quando resulta claro.

E.coli

Quando obtenho colónias inoculo uma durante a noite num meio líquido e no dia seguinte extraio o DNA e após fazer uma electroforese, para quantificar a quantidade que tenho, mando sequenciar para saber se tenho mutação ou não.

Um Resto de tudo

Desce pela avenida a lua nua
Divagando à sorte, dormita nas ruas
Faz-se de esquecida, a minha e tua
Deixando um rasto, que nos apazigua
Sou um ser que odeias mas que gostas de amar
Como um barco perdido à deriva no mar
A vida que levas de novo outra vez
O mundo que gira sempre a teus pés
Sou a palavra amiga que gostas de ouvir
A sombra esquecida que te viu partir
A noite vadia que queres conhecer
Sou mais um dos homens que te nega e dá prazer
A voz da tua alma que te faz levitar
O átrio da escada para tu te sentares
Sou as cartas rasgadas que tu não lês
A tua verdade, mostrando quem és
Entra pela vitrina surrealista
Faz malabarismo a ilusionista
Ilumina o céu que nos devora
Já se sente o frio, está na hora de irmos embora
Sou um ser que odeias mas que gostas de amar
Como um barco perdido à deriva no mar
A vida que levas de novo outra vez
O mundo que gira sempre a teus pés
Sou a palavra amiga que gostas de ouvir
A sombra esquecida que te viu partir
A noite vadia que queres conhecer
Sou mais um dos homens que te nega e dá prazer
Sou a voz da tua alma que te faz levitar
O átrio da escada para tu te sentares
Sou as cartas rasgadas que tu não lês
A tua verdade, mostrando quem és
Sou um ser que odeias mas que gostas de amar
Um barco perdido à deriva no mar
A vida que levas de novo outra vez
O mundo que gira sempre a teus pés
Sou a palavra amiga que gostas de ouvir
A sombra esquecida que te viu partir
A noite vadia que queres conhecer
Sou mais um dos homens que te nega e dá prazer
A voz da tua alma que te faz levitar
O átrio da escada para tu te sentares
Sou as cartas rasgadas que tu não lês
A tua verdade, mostrando quem és
Um resto de tudo
Que possa existir
Mostrando quem ésUm resto de tudo.

João Pedro Pais

Mentira

Dá-me vontade de te ter a meu lado
Vendo-te a olhar para mim
Sei que estou apaixonado
Mas não posso ficar assim
Deitado num rochedo canto para ti
Como um pássaro livre que voa sem fim
Porque é que a vida nos trama
Quando alguém se ama?
Ter de partir
E não poder sorrir
Porque é que choras?
Porque é que dizes o meu nome
Sem nunca me poderes tocar?Tenho saudades de te ver
Vontade de te abraçar
Sozinho tocando uma guitarra
Junto ao mar
Recordo-me de ti
E imagino porquê
A tua cara a flutuar
Porque é que a vida nos fascina?
Tantas vezes nos domina?
Acreditar que no amor
Não se sente a dor
Mas é mentira!Mentira! Mentira!

João Pedro Pais

Onde está a janela?????